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高壓滅菌鍋滅菌效果的驗(yàn)證方法

更新時(shí)間:2018-05-30   點(diǎn)擊次數(shù):6647次
 高壓滅菌鍋使物品滅菌后達(dá)到無(wú)菌要求,這是藥品實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)基本保證。高壓滅菌鍋滅菌效果是否合格是實(shí)驗(yàn)成敗的zui基礎(chǔ)zui關(guān)鍵的首要步驟。本文提供了進(jìn)行滅菌效果驗(yàn)證的一個(gè)簡(jiǎn)易的方法。

試驗(yàn)材料

嗜熱芽孢桿菌紙片;噬熱芽孢桿菌ATCC7053,含芽孢量5105CFU]121 oC壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡;溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基,116~C20分鐘高壓滅菌后備用。0150 oC留點(diǎn)溫度計(jì)

方法與結(jié)果

將嗜熱芽孢桿菌紙片用無(wú)菌鑷子放人密封試管中。化學(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計(jì)放人敞口的試管中。上兩種試管各準(zhǔn)備510份。分別放置在高壓滅菌鍋蒸汽口處、底部排氣口處及底部水口處或上下左右中間5處。如滅菌器為二層,則需放10處】。留點(diǎn)溫度計(jì)標(biāo)化合格后可用于驗(yàn)證試驗(yàn)。檢測(cè)前,需將溫度計(jì)的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測(cè)后留點(diǎn)溫度計(jì)的溫差應(yīng)在1oC之間,則說(shuō)明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。滅菌后的菌片應(yīng)在嚴(yán)格無(wú)菌操作條件下放人滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)。5660~C培養(yǎng)2448小時(shí),觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色,說(shuō)明菌片中的嗜熱芽孢桿菌尚未*滅活,細(xì)菌仍可在培養(yǎng)基中生長(zhǎng),分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色,則說(shuō)明芽孢菌已滅活。同時(shí)要用未經(jīng)滅菌的紙片放人培養(yǎng)基內(nèi)作為陽(yáng)性對(duì)照,不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照?;瘜W(xué)指示卡上的指示色塊,在高壓蒸汽滅菌時(shí),由淡黃色變?yōu)楹谏?。隨著顏色變化的深淺,并與對(duì)照色相比,可判斷滅菌效果是否達(dá)到要求?;瘜W(xué)指示卡應(yīng)在干燥處保存。遇潮會(huì)變色,影響滅菌效果的觀測(cè)。高壓蒸汽滅菌必須使蒸汽順利進(jìn)入滅菌器內(nèi),與滅菌物品接觸,并將原有的冷空氣排出方可達(dá)到滅菌的效果。要進(jìn)行空載熱分布和滿(mǎn)載熱穿透力驗(yàn)證(滿(mǎn)載時(shí)不超過(guò)總體積的23)。二種驗(yàn)證各重復(fù)三次,共做六次見(jiàn)表。5個(gè)點(diǎn)六次試驗(yàn)表明溫度均在121 oC,化學(xué)指示卡變黑;程度與對(duì)照色一致;培養(yǎng)基均未改變顏色,說(shuō)明高壓蒸汽滅菌效果合格。

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